TRIpure Reagent（總RNA提取裂解液）

目錄號：LPKT-100
包裝單位:  100ml

適用范圍：
適用于各種動植物組織/細胞總RNA、DNA、蛋白的快速抽提
產(chǎn)品儲存：
TRIpure在室溫下能穩(wěn)定保存12個月。盡管如此，為達到最佳效果，建議保存在2~8°C的環(huán)境下。

重要提示：
有毒物接觸皮膚或者不慎吞服，會導致灼傷。一旦接觸皮膚后立即以大量的洗滌劑和清水清洗。若感不適，看醫(yī)生并尋求苯酚和其他成分的正確治療方案。

產(chǎn)品介紹：
TRIpure試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。加入氯仿后離心，樣品分成水樣層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后，RNA可以通過異丙醇沉淀來還原。在除去水樣層后，樣品中的DNA和蛋白也能相繼以沉淀的方式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA，在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白。共純化DNA對于樣品間標準化RNA的產(chǎn)量十分有用。無論是人、動物、植物還是細菌組織，該方法對少量的組織(20-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個的樣品。所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。故而能夠滿足RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等各類生物分子學實驗需求。

注意事項：
1. 當TRIpure用量少于2ml時建議使用清潔的一次性的聚丙材質(zhì)試管。
2. 當TRIpure用量較大時，可以使用玻璃試管(Corex)或聚丙材質(zhì)試管，事先檢驗以確保該試管可以耐受加入TRIpure和氯仿后12,000×g的離心力。不可使用有裂縫或者破損的試管。
3. 離心前小心平衡試管。
4. 離心前玻璃管口必須蓋上鋁箔并用石蠟膜封口，聚丙烯管必須蓋緊。
5. 從少量的組織(1~10mg)或細胞(102~104)中分離RNA樣品：往組織或細胞中加800µlTRIpure。待樣品裂解后，加入氯仿并進行步驟2中的抽提操作。在用異丙醇沉淀RNA之前，加入5~10μg無RNA酶的glycogen作為水樣層的載體。為降低其黏度在加入氯仿前用26號注射器抽吸兩次以切斷基因組DNA。Glycogen會留在水樣層中并和RNA共析出。在濃縮到4mg/ml之前它不會抑制逆轉(zhuǎn)錄反應第一鏈的合成也不會抑制PCR。
6. 在勻化后和加入氯仿之前，樣品可以在–60~–70°C保存至少一個月。RNA沉淀（步
驟4，RNA漂洗）溶于75%的乙醇在2~8°C至少可以保存一周，在–5~–20°C下至少可保存一年。
7. 臺式離心機最大能達到2,600×g的離心力，如果將離心時間延長到30~60分鐘可
以滿足步驟2和步驟3中的操作。