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紫外可見分光光度計--原理及使用

?? 2021-07-03 11720
核心提示:去百度文庫,查看完整內容>內容來自用戶:lezai945應用分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸、蛋白定量以及
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內容來自用戶:lezai945

應用
分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。我們實驗室多參數PH,溶解氧水質檢測儀主要是用來測物質的光度以求得物質的濃度或者酶活。
基本原理
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團的信息,可以用標準光譜圖再結合其它手段進行定性分析。
朗伯-比爾定律:當一束平行單色光通過含有吸光物質的稀溶液時,溶液的吸光度與吸光物質濃度、液層厚度乘積成正比,即
A=kcl
式中比例常數k與吸光物質的本性,入射光波長及溫度等因素有關。c為吸光物質濃度,l為透光液層厚度。
組成
  各種型號的紫外-可見分光光度計,就其基本結構來說,都是由五個基本部分組成,即光源、單色器、吸收池、檢測器及信號指示系統。
1.光源
在紫外可見分光光度計中,常用的光源有兩類:熱輻射光源和氣體放電光源。熱輻射光源用于可見光區,如鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光區,如氫燈和氘燈。
2.單色器
單色器的主要組成:入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準直鏡等部分。
單色器質量的優劣,主要決定于色散元件的質量。色散元件常用棱鏡和光柵。由吸光度隨時間的變化計算酶的活性。

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